淋菌培养是诊断淋病的重要依据之一。对于妇女淋病及男性慢性淋病在临床诊断符合淋病而涂片检查阴性者均应做淋菌培养。常用的培养基有血琼脂和巧克力琼脂以及Thither-Martin（M-T）培养基。培养的最适条件是潮湿的含3％～10％二氧化碳的环境，温度为35～37℃，许多淋球菌可生长在没有外源性二氧化碳供给的增菌培养基中。经数次人工培养后，淋球菌的发育变得容易，可以不需要二氧化碳，且也能在普通培养基中生长。培养淋球菌的培养基的pH值以7．4为好。经24～48小时观察菌落形态及菌体形态特征，菌落特征为圆形、中央隆起，浅白或淡灰色半透明，表面光滑。

男性患者前尿道取材时，应用细小无菌棉拭伸入尿道2～4cm处，略作捻转后取出。女性患者宫颈取材时，应用温水湿润扩阴器，然后将棉拭插入宫颈管内1cm处，稍转动并停留半分钟后取出。从直肠取材时，应将棉拭插入肛门2．5cm处。检查淋菌性咽炎时，应从扁桃体或扁桃体窝处取材。

检查有无淋球菌感染。淋球菌的培养主要用于进一步诊断（如症状像淋病而涂片检查阴性的患者），症状很轻或无症状的女子和男子淋球菌培养都是敏感的。因此，淋球菌培养是目前世界卫生组织推荐筛选淋病患者的惟一方法。

淋球菌培养阴性。